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無菌檢查為何需要14天培養(yǎng)期

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  • 發(fā)布時間： 2025-03-25
2025-03-25

無菌檢查試驗通用培養(yǎng)基為硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基。

 

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基主要用于厭氧菌的培養(yǎng)，也可用于需氧菌培養(yǎng)；硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度為30~35℃；硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基在培養(yǎng)期間不要劇烈震動或搖晃培養(yǎng)基，以盡量減少培養(yǎng)基通氣。
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基用于真菌和需氧菌的培養(yǎng)；胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度為20~25℃；胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基在培養(yǎng)期間可以輕緩搖動，以增加培養(yǎng)基的通氣。 
如在加入供試品后，或在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)14天后，不能從外觀上判斷有無微生物生長，可取該培養(yǎng)液不少于1ml 轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中，將原始培養(yǎng)物和新接種的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)不少于4天，觀察接種的同種新鮮培養(yǎng)基是否再出現(xiàn)渾濁；或取培養(yǎng)液涂片、染色、鏡檢，判斷是否有菌。USP 和 EP 規(guī)定的出現(xiàn)渾濁后的處理程序與《中國藥典》 一致，原培養(yǎng)容器與轉(zhuǎn)種培養(yǎng)容器的總培養(yǎng)時間為不少于18天。
長達14天的培養(yǎng)期的主要原因：
無菌產(chǎn)品中存活的微生物在生產(chǎn)工藝過程中都會經(jīng)歷一定程度的損傷而處于亞致死的狀態(tài)，它們需要有一段修復的時間才能生長繁殖到肉眼看得到的程度而被檢出；
也有可能在抑菌類產(chǎn)品中一直被抑制著的污染微生物處于亞致死狀態(tài)，需要隨著培養(yǎng)時間的延長或抑菌性徹底消除后才能得以繁殖到肉眼看得到的程度而被檢出；
還有可能產(chǎn)品中污染的微生物本身屬于生長遲緩的微生物，例如，痤瘡丙酸桿菌是無菌灌封中令人頭痛的一種微生物，根據(jù)經(jīng)驗，該微生物直到在培養(yǎng)基中培養(yǎng)12天后才能生長到肉眼可以觀察的濃度。所以無菌檢查法培養(yǎng)不少于14天是有必要的。 當然，受到損傷的微生物也需要一定的延遲期才能恢復生長。
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